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PCR实验室如何设计?PCR实验室改造建设

2021-12-22 11:56:01

PCR实验室如何设计?PCR实验室改造建设

  PCR实验室,即基因扩增实验室,是专门用来检验艾滋病、乙型肝炎、禽疫病等病毒感染性疾病。下面本文就来介绍一下PCR实验室设计改造要求。

一、PCR 实验室设计要求

  1、标准的PCR实验室产物分析区或三个区域的最后一个区域(即扩增及产物分析区),空气流向应由室外向室内,可通过在室内设置通风橱、排风扇或其他排风系统达到空气流由室外向室内流动的要求。

  2、PCR 实验室依据所使用的方法可分为试剂准备、标本制备、扩增、产物分析等三或四个区域。只是使用实时荧光PCR仪、HIV病毒载量测定仪的PCR实验室,有上述前面三个区域即可。各区域完全独立分隔,不能有空气直通。

  3、PCR实验室各区域仪器设备配备通常如下:

  (1)标准的PCR实验室标本制备区。仪器设备主要应有生物安全柜(最好为B2,能够避免提取核酸在柜内反复循环,造成标本间交叉“污染”,出现假阳性结果。另外,还需要配备加样器、台式高速离心机(冷冻及常温)、台式低速离心机、恒温设备(水浴和/或干浴仪)、冰箱、混匀器和可移动紫外灯等。

  (2)标准的PCR实验室试剂准备区。仪器设备主要应有加样器、冰箱、天平、低速离心机、混匀器、可移动紫外灯等。可使用超净工作台作为试剂配制操作台面。

  (3)标准的PCR实验室产物分析区。本区所使用的仪器设备可能有加样器、电泳仪(槽)、电转印仪、杂交炉或杂交箱、水浴箱、DNA测序仪、酶标仪和洗板机等。在理想情况下,PCR实验室试剂准备、标本制备、扩增三个区域可设置缓冲间。在缓冲间内,可设置正压,使室内空气不流向室外,室外空气不流向室内。

  (4)标准的PCR实验室扩增区。主要仪器就是核酸扩增热循环仪(PCR仪,实时荧光或普通的)。热循环仪的电源应专用,并配备一个稳压电源或UPS,以防止由于电压的波动对扩增测定的影响。此外,根据工作需要,还可配备加样器、超净台等。

二、PCR实验室改造建设

  1、PCR实验室装修缓冲室、PCR扩增区排风机向外排风,外墙及各门设有不同风量以及可调的回风口。空气可以通过系统回风口换到一个室内。

  2、PCR实验室改造实验区、缓冲室顶部及传送窗均设有紫外线灯消毒。试剂可以制备区和标本方法制备区可配备一个移动式空气紫外线灯进行严格消毒。

  3、医院中PCR实验室不仅可以是分散式,也可以是组合式。通常完成一套PCR实验需要经过四个过程:试剂制备、样品数据处理、核酸扩增和产物研究分析。如果实验过程管理需要,还应不断增加样品破碎过程。

  4、试剂制备和样品制备区域为微正压,核酸扩增室和产品分析室为微负压,防止有核酸气溶胶扩散污染试剂和样品。 可以通过控制排气量大于进气量来实现负压效应。

  5、在理想的条件下,可在PCR实验室的缓冲室内设置正压,避免室内空气向外流出、室外空气流入室内。

  6、若是房间深度允许,可在PCR内设置专用走廊。

  7、PCR实验室改造的时候各区域要有一个单向进行实验教学流程、物流、人流和气流,形成一种单向发展过程的防护屏障,避免实验环境干扰和实验研究过程中核酸气溶胶污染的假性结果。

  8、若是实验室室内房间比较低,改造PCR实验室时可在走廊或实验室之外的新风机和排风机。管道应该是圆形或扁平。铺设后,需要进行压力和泄漏测试。接口导管和阀按照施工过程中严格操作,以最小化维护夹层去除的频率。

三、PCR 实验室建设布局

  1、实验室的气流也应从扩增前区流向扩增后区,不得逆向流动。各工作区域应设置缓冲间,工作间与缓冲间之间宜安装连锁装置。不同功能的核酸检验工作区应是分隔独立的工作室,并有明显的标志,各区间不能直通。各区之间如果是紧密相连,需安装物品传递窗。每个工作区域的顶部应安装紫外灯,紫外灯的波长为254m,安装数量为每20m安装一支40W的紫外灯。

  2、PCR实验室理想的布局应有一个专用走廊,试剂准备区、样品制备区、扩增区和产物分析区很规范地排列在一起,前三个区各有一个缓冲间,可供换工作服和工作鞋使用,顶上可装一紫外灯。

  3、内实验区域设为正压或常压状态,缓冲间内设为负压状态(可上设一抽风装置),使这三个区的空气流向为由实验区域内向外,缓冲间内通向内实验室和走廊的门可安装一种连锁装置,当一个门打开时,另一门必须处于关闭状态,防止出现两个门同时打开的情况。

  4、产物分析区可不设缓冲间,但应设为负压状态(装一个排风扇即可)、使空气流向由外向内,以防止扩增产物的随空气流出。

  5、每一区域都须有明确的标记,工作按试剂准备区、样品制备区、扩增区至产物分析区单一流向进行,各区的仪器设备包括工作服、鞋、实验记录本和笔等都必须专用。

  6、实验材料、试剂、记录纸、笔、清洁材料等,只能从扩增前区流向扩增后区,即从试剂准备区到样品制备区到扩增区再到扩增产物分析区,不能逆向流动。

  以上就是关于PCR实验室设计改造要求的相关介绍,供大家参考。

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